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黃曲霉B1檢測卡 操作說明
閱讀：2649 發布時間：2019-5-15
黃曲霉毒suB1（Aflatoxin B1簡寫為AFB1）是目前已知的化學物質中致癌性zui強的一種。黃曲霉毒suB1對人和若干動物具有強烈的毒性，其毒性作用主要是對肝臟的損害。國家質檢總局規定黃曲霉B1是大部分食品的必檢項目之一。本品的檢測靈敏度為5ng/ml。
【測定原理】
本品采用高度特異性的抗體抗原反應及免疫層析分析技術，通過單克隆抗體競爭結合AFB1-BSA偶聯物和樣品中可能含有的AFB1的原理。試劑含有被事先固定于膜上測試區（T）的AFB1-BSA偶聯物和被膠體金標記的抗AFB1單克隆抗體。
【樣品制備】
使用儀器：①感量0.1g的天平 ②玻璃器皿：蒸發皿或燒杯、量筒、滴管、移液管 ③小型粉碎機、④ 4000rpm離心機等。
1. 谷物：任取5g以上有代表性樣品并粉碎過20目篩，準確稱取2.0g均勻粉碎試樣于配套離心管中，再準確加入4ml純凈水和4.0ml乙酸乙酯，將瓶塞蓋緊密封，充分振蕩5min，4000rpm離心1min得上清液，將上清液用吸管移出2.0ml到蒸發皿或小玻璃杯中，用電吹風吹干上清液，再根據樣品的種類用以下規定的稀釋液量用鋁箔袋內配套吸管反復沖洗，*溶解杯底所有的固體，此溶解液為樣品提取液即檢測液。考慮不同樣品對黃曲霉毒suB1的高含量要求，請參考下表進行用稀釋液溶解杯底固體：
谷物殘留*（ppb） | 2.5 | 5 | 10 | 20 |
使用稀釋液體積（ml） | 0.4 | 0.8 | 1.6 | 3.2 |
2. 飼料（以殘留*50ppb計算）：任取5g以上有代表性樣品并粉碎過20目篩，準確稱取2.0g均勻粉碎試樣于配套離心管中，再準確加入4ml純凈水和4.0ml乙酸乙酯，將瓶塞蓋緊密封，充分振蕩5min，4000rpm離心1min得上清液，將上清液用吸管移出0.5ml到蒸發皿或小玻璃杯中，用電吹風吹干上清液，再用2ml的稀釋液量用鋁箔袋內配套吸管反復沖洗，*溶解杯底所有的固體，此溶解液為樣品提取液即檢測液。如果殘留*是30ppb，則用1.2ml的稀釋液溶解；如果殘留*是40ppb，則用1.6ml的稀釋液溶解。
3. 食用油：稱2.0g油樣于小燒杯中，用8ml正乙烷分次將試樣轉移至分液漏斗中，準確加入4ml純凈水充分振蕩3min，吸去上層正乙烷層，再加入4ml的乙酸乙酯，將瓶塞蓋緊密封，充分振蕩5min，靜置或3000rpm離心得上清液，將上清液用吸管移出2ml到小玻璃杯中，用電吹風吹干，再用稀釋液溶解后為樣品提取液。
4. 醬油、醋、發酵酒：稱取25.0g樣品于小燒杯中，用5ml蒸餾水將試樣轉移到分液漏斗中，加入20ml三氯甲烷，加塞輕輕振搖3min，靜置分層。放出下層三氯甲烷層，經盛有約5g預先用三氯甲烷濕潤的無水Na2SO4過濾器于蒸發皿中，后用少量三氯甲烷洗滌過濾器，洗液并于蒸發皿中，用電吹風吹干。吹干冷卻后，準確加入稀釋液，將蒸發皿中的凝結物充分溶解。
【操作步驟】
1. 在進行檢測前先完整閱讀使用說明書，使用前將試紙卡和待檢樣本溶解恢復至室溫。
2. 從原包裝袋中取出試紙卡，打開后平放在桌面上，請在1小時內盡快使用。
3. 用吸管吸取待檢樣品溶液，滴加3滴于加樣孔中，加樣后開始計時。
4. 結果應在5min左右讀取，超過10min的時間判讀無
【結果判定】
1.陽性：位置C顯示出紅色線條，而位置 T不顯色時為陽性。陽性結果表明：AFB1含量超過樣品允許量。
2.陰性：位置C顯示出紅色線條，位置 T同時顯示出紅色線條，且T線顏色接近C線或者深于C線時，判為陰性。陰性結果表明：AFB1含量低于樣品允許量。
3.無效：位置C不顯示出紅色線條而位置 T顯示出紅色線條或位置C和位置 T均無線，該試紙卡視為無效。建議使用新的試紙卡按本說明書要求重新測試。
【特別說明】
1.請按照操作步驟進行測試，操作時請勿觸摸試紙顯示區。
2.如購買時發現過期，破損，污染，無效的產品，請到購買處進行更換。
3.本品應保存在干燥陰涼處（4--30℃），有效期12個月，生產日期見包裝。
4.本品為一次性產品，請勿重復使用。
5.如遇稀釋液不足，請用蒸餾水加入稀釋液中混勻后使用。
6.本品為篩選試劑，任何陽性結果請用其他方法做進一步確認。
7.有條件的實驗室可以用AFB1標準品測試后作為判斷參考。